Anda juga dapat menghilangkan garam sampel Anda dengan ultrafiltrasi hingga sepersepuluh volume sebelumnya, yang mencairkan lagi dan ulangi langkah UF. Metode terbaik untuk menghilangkan garam adalah des alting dengan filtrasi gel terhadap buffer 50 mM, daripada ultrafiltrasi (klasik, bukan sentrifugal).
Apa yang dimaksud dengan des alting dalam pemurnian protein?
Des alting digunakan untuk menghilangkan garam dari larutan protein, fenol atau nukleotida tak tergabung dari asam nukleat atau ikatan silang berlebih atau pelabelan reagen dari protein terkonjugasi.
Bagaimana cara memurnikan protein?
Dalam pemurnian protein massal, langkah pertama yang umum untuk mengisolasi protein adalah presipitasi dengan amonium sulfat (NH4) 2SO4. Ini dilakukan dengan menambahkan jumlah amonium sulfat yang meningkat dan mengumpulkan fraksi yang berbeda dari protein yang diendapkan. Selanjutnya, amonium sulfat dapat dihilangkan menggunakan dialisis.
Bagaimana Anda menyangga pertukaran protein?
Pertukaran buffer, bagaimanapun, dilakukan dengan penyeimbangan pertama dengan resin kolom dengan buffer sampel harus masuk. Dalam kedua kasus, konstituen buffer membawa sampel ke kolom akan diganti dengan solusi yang digunakan untuk menyetarakan kolom sebelumnya.
Mana dari teknik kromatografi berikut yang dapat diterapkan untuk menghilangkan garam protein?
Seperti disebutkan di atas, gel filtrasi dapat digunakan secara efektif untuk proteinmenghilangkan garam dan dilakukan dengan terlebih dahulu menyeimbangkan kolom filtrasi gel dengan air. Namun, pertukaran buffer dilakukan dengan terlebih dahulu menyeimbangkan resin kolom dengan buffer target.
