Karena dinding sel sangat tahan terhadap sebagian besar senyawa, organisme tahan asam memerlukan teknik pewarnaan khusus. Pewarna utama yang digunakan dalam pewarnaan tahan asam, karbolfuchsin, larut dalam lemak dan mengandung fenol, yang membantu pewarna menembus dinding sel. Hal ini selanjutnya dibantu oleh penambahan panas.
Mengapa panas diperlukan untuk pewarnaan tahan asam?
Memanaskan slide membantu melunakkan bahan lilin pada dinding sel bakteri. Bahan lilin bersifat hidrofobik terhadap larutan berair tetapi tidak terhadap larutan fenolik dari fuchsin dasar. Oleh karena itu karbol fuchsin yang kuat mampu menodai sel. Setelah pewarnaan, mereka cenderung menolak dekolorisasi oleh 20% H2SO4 (asam sulfat).
Bagaimana cara pewarnaan tahan asam?
Petunjuk Pewarnaan Tahan Asam
- Air kering dan panas memperbaiki lapisan tipis mikroorganisme. …
- Banji slide dengan Carbolfuchsin. …
- Flood slide dengan Acid Alcohol selama 30 detik. …
- Counterstain dengan membanjiri slide dengan Methylene Blue selama 30 detik. …
- Keringkan slide dengan meletakkannya di antara halaman-halaman buku kertas Bibulous.
Apakah pewarnaan Gram membutuhkan panas?
Pewarnaan Gram biasanya dilakukan pada sediaan apus yang telah difiksasi dengan panas. Salah satu fungsi fiksasi adalah untuk mengamankan (memperbaiki) sel ke slide. Dalam biofilm, bagaimanapun, sel-sel sudah melekat erat. Selanjutnya, panas tetapslide kering, tetapi sebagian besar biofilm adalah air.
Noda apa yang tidak membutuhkan panas?
Ini melibatkan aplikasi pewarna primer (basic fuchsin), penghilang warna (asam-alkohol), dan counterstain (metilen biru). Berbeda dengan pewarnaan Ziehl–Neelsen (pewarnaan Z-N), metode Kinyoun pewarnaan tidak memerlukan pemanasan.