Pemuatan antibodi kontrol adalah kontrol penting karena menunjukkan pemuatan sampel yang sama di semua sumur. Kontrol pemuatan juga menunjukkan transfer protein yang tepat ke membran selama proses western blotting. Kontrol pemuatan biasanya berupa protein dengan ekspresi tinggi dan ada di mana-mana.
Apa yang dilakukan kontrol pemuatan?
Kontrol pemuatan adalah protein yang digunakan sebagai kontrol dalam percobaan Western blotting. … Mereka digunakan untuk memastikan bahwa protein telah dimuat secara merata di semua sumur.
Mengapa kita menggunakan kontrol pemuatan di Western blot?
Kontrol pemuatan memiliki peran kedua sebagai kontrol di western blot. Mereka dapat digunakan untuk memeriksa apakah telah terjadi perpindahan yang merata dari gel ke membran di seluruh gel. Ini sangat penting ketika perbandingan dibuat dari tingkat ekspresi protein antara sampel.
Bagaimana Anda menggunakan kontrol pemuatan di Western blot?
Sinyal dari kontrol pemuatan biasanya digunakan untuk menormalkan sinyal dari protein yang diinginkan. Untuk menggunakan kontrol pemuatan untuk tujuan ini, deteksi dengan antibodi protein kontrol dan antibodi eksperimental harus dilakukan pada noda yang sama. Berbagai protein berbeda digunakan sebagai kontrol pemuatan.
Mengapa aktin digunakan sebagai kontrol pemuatan?
Beta-actin, biasanya digunakan sebagai kontrol pemuatan untuk Western Blot kemenormalkan kadar protein yang terdeteksi dengan mengonfirmasi bahwa pemuatan protein sama di seluruh gel.
