Semakin besar berat molekul, semakin panjang kumparan dan semakin lambat pergerakan molekul. Jadi, elektroforesis + SDS memisahkan berdasarkan berat molekul, bukan berdasarkan muatan asli. Catatan penting: Protein dengan panjang yang sama biasanya tidak dapat dipisahkan dengan elektroforesis gel + SDS.
Bagaimana cara memisahkan protein dengan berat molekul yang sama?
Sentrifugasi, elektroforesis, dan kromatografi adalah teknik yang paling umum untuk memurnikan dan menganalisis protein. Sentrifugasi memisahkan protein berdasarkan laju sedimentasinya, yang dipengaruhi oleh massa dan bentuknya.
Teknik mana yang memisahkan protein berdasarkan muatannya?
Protein dapat dipisahkan berdasarkan muatan bersihnya dengan kromatografi penukar ion. Jika protein memiliki muatan positif bersih pada pH 7, biasanya akan mengikat kolom manik-manik yang mengandung gugus karboksilat, sedangkan protein bermuatan negatif tidak (Gambar 4.4).
Mana dari teknik berikut yang paling cocok untuk memisahkan protein berdasarkan berat molekulnya?
Metode kromatografi berdasarkan partisi sangat efektif dalam pemisahan, dan identifikasi molekul kecil seperti asam amino, karbohidrat, dan asam lemak. Namun, kromatografi afinitas (yaitu kromatografi pertukaran ion) lebih efektif dalam pemisahan makromolekul sebagai asam nukleat, dan protein.
Tipe kolom apakromatografi memisahkan protein berdasarkan berat molekul?
Kromatografi filtrasi gel (GF) memisahkan protein hanya berdasarkan ukuran molekul. Pemisahan dicapai dengan menggunakan matriks berpori di mana molekul, untuk alasan sterik, memiliki derajat akses yang berbeda--yaitu, molekul yang lebih kecil memiliki akses yang lebih besar dan molekul yang lebih besar dikeluarkan dari matriks.
