Trypsinization adalah proses disosiasi sel menggunakan tripsin, enzim proteolitik yang memecah protein, untuk memisahkan sel-sel yang melekat dari wadah tempat mereka dikultur. Ketika ditambahkan ke kultur sel, tripsin memecah protein yang memungkinkan sel untuk menempel pada pembuluh.
Mengapa kita melakukan trypsinize sel?
Trypsinization sering dilakukan untuk mengizinkan lewatnya sel ke wadah baru, pengamatan untuk eksperimen, atau pengurangan tingkat keterpaduan dalam labu dengan menghilangkan persentase sel.
Bagaimana cara kerja tripsin untuk melepaskan sel?
Trypsin/EDTA adalah metode gabungan untuk memisahkan sel. Tripsin memotong protein adhesi pada interaksi sel-sel dan matriks sel dengan memotong asam amino protein adhesi khususnya pada lisin atau aginin pada terminal-C jika asam amino hulu bukan prolin.
Bagaimana Anda mendapatkan sel-sel yang terikat tripsin?
Prosedur
- Keluarkan media dari wadah kultur dengan aspirasi dan cuci monolayer dengan larutan garam bebas Ca2+ dan Mg 2+ untuk menghapus semua bekas serum. …
- Masukkan larutan tripsin atau tripsin/EDTA secukupnya ke dalam wadah kultur untuk menutupi lapisan tunggal sel sepenuhnya dan tempatkan dalam inkubator 37 °C selama ~2 menit.
Bagaimana cara menonaktifkan tripsin dalam kultur sel?
Setelah sel muncul terlepas tambahkan 2 volumemedia pertumbuhan lengkap yang telah dihangatkan sebelumnya untuk menonaktifkantripsin. Bubarkan media secara perlahan dengan memipetkan permukaan lapisan sel beberapa kali untuk memastikan pemulihan >95% sel. Untuk biakan bebas serum, penghambat tripsin kedelai (No. Produk
