Inkubasi wadah dalam suhu ruangan selama 2-3 menit . Sel-sel yang melekat kuat dapat dilepaskan dengan cepat pada suhu 37 °C. Amati sel di bawah mikroskop. Sel-sel yang terlepas tampak bulat dan refraktil di bawah mikroskop.
Apa yang terjadi jika Anda melakukan trypsinize sel terlalu lama?
Menginkubasi sel dengan konsentrasi tripsin yang terlalu tinggi dalam jangka waktu yang terlalu lama akan merusak membran sel dan membunuh sel. Jika tidak yakin tentang konsentrasi tripsin yang digunakan, gunakan konsentrasi rendah.
Bagaimana Anda melakukan tripsinisasi sel?
Sel dapat disuspensikan kembali dengan pipet suspensi sel secara perlahan untuk memecah gumpalan. Pengenceran lebih lanjut dapat dilakukan, jika diperlukan, untuk jumlah sel dan/atau subkultur.
Berapa lama waktu yang dibutuhkan sel untuk menempel?
sel pertama sudah terpasang setelah 3-5 menit! Dalam pengalaman saya, sebagian besar EC dipasang setelah 10-20 menit. Tetapi semakin lama Anda menunggu, semakin kuat keterikatannya.
Apakah buruk untuk melakukan tripsinisasi sel dua hari berturut-turut?
Ya berbahaya jika Anda terus menerus melakukan trypsinizing sel setelah 24 jam membelah. Disarankan untuk melakukan pembelahan setelah 48 jam membelah. … Anda dapat mempertahankan sel sampai morfologinya baik (Tergantung pada jenis sel Anda, beberapa sel dapat mencapai 80 bagian dan beberapa hingga 10).